http://doc.docsou.com/dxyz-b109-99-t-345518非常详细 各菌种保存方法的优缺点
1.斜面低温保藏法
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月,移种一次。酵母菌两个月,细菌最好每月移种一次。
此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法,优点是操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,屡次传代会使微生物的代谢改变,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多。
2.液体石蜡保藏法
(1)将液体石蜡分装于三角烧瓶内,塞上棉塞,并用牛皮纸包扎,
1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌30分钟,然后放在40℃温箱中,使水汽蒸发掉,备用。
(2)将需要保藏的菌种,在最适宜的斜面培养基中培养,使得到健壮的菌体或孢子。
(3)用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡,注入已长好菌的斜面上,其用量以高出斜面顶端1cm为准,使菌种与空气隔绝。
(4)将试管直立,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。
此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌,在37℃温箱内,亦可保藏3个月之久。此法的优点是制作简单,不需特殊设备,且不需经常移种。缺点是保存时必须直立放置,所占位置较大,同时也不便携带。从液体石蜡下面取培养物移种后,接种环在火焰上烧灼时,培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅,应特别注意。
3.滤纸保藏法
(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌30分钟。
(2)将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。
(3)取灭菌脱脂牛乳1—2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。
(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,塞上棉塞。
(5)将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干。
(6)将棉花塞入管内,用火焰按图Ⅶ-13熔封,保存于低温下。
(7)需要使用菌种,复活培养时,可将安瓿管口在火焰上烧热,滴一滴冷水在烧热的部位,使玻璃破裂,再用镊子敲掉口端的玻璃,待安瓿管开启后,取出滤纸,放入液体培养基内,置温箱中培养。
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14—17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便,不需要特殊设备。
《 淡水渔业 》 2005 年第 35 卷第 3 期 光合细菌保种方法的优化研究张李阳 吴向华 丽戴 (南京晓庄学院生命科学系 ,南京 210017 ) 摘要 从菌种的保存时间 ...
维普资讯 http://www.cqvip.com 《 淡水 渔q}05年第3120~ 5卷第 3期 光合 细菌 保种方法 的优 化研究 张李阳 吴向 戴 华 丽( 南京晓庄 学院 生命科...
。 近几年来培养光合细 菌实 践过程中已探索 出点 滴经验 , , 在保种方法上业 , 添加稳 定荆 光合细菌在培 养和 保种过程、 并结 合常规保种方法 , ...
细菌的分离纯化生化试验以及保种_生物学_自然科学_专业资料。项目总览 1、细菌的...用划线的方法或 用稀释涂布的方法将混杂菌群的微生物各个分 开,通过挑选单...
细菌保种方法 3页 1下载券 保你一天不困的25种小方... 3页 2下载券 2011...v。 .s 畜禽保种 的理 论和方法 一 4;6- .. 婆堕 型些}壁 寥j 、...
? ? 液体石蜡覆盖保存法该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适 用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保 存。此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而 达到...
此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌 种的短期保藏及不...它是以甘油、二甲基亚砜等作为保 护剂,在液氮超低温(-196℃)下保藏的方法。...
目前菌种的保存方法主要有以下几种:1.传代培养保存法:一般来说,这是最基本的...变相方法,可以适 当地延长保存时间,主要适用于霉菌,酵母菌,放线菌,需氧性细菌...
2 原理 冷冻干燥保藏菌种法可克服简单保藏方法的不足。 利用有利于菌种保 藏的...霉菌、放线菌及芽孢菌保存 2-4 个 月移种一次,酵母菌间隔两个月,普通细菌...
取 1mL 实验所得菌液,加入 1mL 60%灭菌甘油,装入保种管中,-80℃冰箱中 ...DNA 分离及 PCR 鉴定:细菌/酵母等基因组 DNA 快速纯化方法: 1. 1.5ml 菌...
热门文档