微生物实验报告——真菌的观察

微生物学实验报告

酵母菌形态观察、大小测定和计数，放线菌和霉菌形态观察

2012/4/26

实验目的：

1. 观察酵母菌的形态和出芽生殖，学习显微镜镜台测微尺和目镜测微尺的使用，并掌握用测微尺测定微生

物大小的方法。

2. 学习并熟练掌握血细胞计数板测定微生物细胞大小的方法。 3. 学习掌握扦片法观察放线菌的形态特征。 4. 学习掌握载玻片法观察霉菌的形态特征。实验原理：

1. 微生物大小的测定。

显微镜测量微生物大小需借助目镜测微尺和镜台测微尺的配合。镜台测微尺是一张中央封固有标准刻度的特制载玻片，刻尺总长1mm，划分为10个大格和100个小格，每小格长度为0.01mm。镜台测微尺的作用是校正目镜测微尺每格的相对长度。

目镜测微尺是一块中央有精确等分刻度的圆形玻璃片，可嵌入目镜内焦点处。使用前需用镜台测微尺校正，获得一定放大倍数的目镜和物镜下每小格所代表的相对实际长度。 2. 显微计数法。

显微计数法是将少量样品的悬浮液置于一种具有确定容积的载玻片上，在显微镜下直接观察、计数的方法。

本实验使用血细胞计数板对酵母菌进行计数。血细胞计数板是由4条沟槽和3个平台构成的特制载玻片，中间较宽的平台被横槽隔成两半，每一边的平台上刻有一个方格网，中间的大方格即为计数室。血细胞计数板的大方格分两种规格：25×16和16×25，都有400个小格。每一个大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，盖玻片与载玻片之间计数室的容积为0.1mm3。

计数时，通常数5个中方格的总菌数，求得平均值后可计算出1ml菌液中的总菌数。 3. 酵母菌形态观察。

酵母菌是单细胞个体，大小是细菌的几倍到几十倍，大多数出芽生殖，也可通过产生子囊孢子有性生殖。酵母菌的观察一般采用美兰染液水浸片法，因为普通的涂片法可能损伤酵母菌细胞。采用美兰染液水浸片法还可以鉴别酵母菌的死活。酵母菌活细胞新陈代谢具有较强的还原能力，可以将美兰显蓝色的氧化型转变为无色的还原型，而死细胞和代谢能力微弱的衰老细胞还原能力弱，染色后呈蓝色或淡蓝色。

（上图）酵母菌出芽生殖

微生物实验报告——真菌的观察