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外周血细胞形态学检验及技巧

外周血细胞形态学检验及技巧

卫生部北京医院血液科 郑天林

卫生部临床检验中心 彭明婷 谷小林 陆红

一. 血液学及血细胞形态学临床应用:

● 是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。

● 血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。

● 近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现,细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用,推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。

● 当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断,必须以临床和血细胞形态学为基础,将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中,构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术,弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷,才能提高血液病的诊断与治疗水平。

● 进入90年代以来,国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案:

○ FAB-AL(1976)、NCL(美国国家癌症研究所)对FAB-AL分型的补充(1995)、AL-MIC分(类)型,MIC 及MICM分型(1985-1990 );

○ FAB-CL分型(1989)、中国CL分型(1997);

○ FAB-MDS分型(1982)、MIC 协作组对FAB-MDS分型提出补充建议(1987);

○ WHO对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤 WHO 分类 (2000);

● 血细胞形态学诊断技术正在进入显微 图象 软件时期:

○创造出许多多功能软件,如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。

○将显微镜与微机相连,应用储存、分类、检索软件,编辑、打印诊断报告,并可附多幅细胞图象。

二. 血细胞形态学基本概念

血细胞形态学作为临床血液病基础诊断:

● 观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分,是诊断造血系统疾病最基本、最简便实用的检查方法,被临床普遍应用。

● 正常人的血液及造血器官中,各种血细胞的数量有一定的正常范围,不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。

● 在造血系统疾病中,如果造血功能发生紊乱,就会从血细胞形态学的量变和质变中反映出来。 ● 血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成,必须平行进行检查。因为,外周血的血细胞改变往往反映骨髓病变的信息,才有利于诊断。

三.血细胞染色

(一) 细胞染色机制 :染色是将细胞经染色剂的物理及化学作用,使 其清楚 显示细胞各个组成部分,有利辨识细胞形态。

染色可分二个步骤:

1 .染料受相应物质吸附而附着于物质表面;

2 .固着作用,即染色粒子进入细胞内起化学反应(染料透过细胞膜的学说很多,尚无定论),与相应的物质形成溶解度很低的盐固着于细胞内而显色。染色剂皆有选择作用,其染色不是将细胞全部一齐着色,而只是将其中一部分染色,多余的被冲洗掉。目前多以吸附学说(电力吸附、机械吸附、化学吸附)来解释。 ● 一般染色方法由两种染色剂(酸性、碱性)组成,通常细胞核及浆 碱性粒体为 碱性,细胞浆为酸性。酸性染料可和带正电荷的(碱性)物质结合,这种物质称嗜酸性物质,对酸性染料具有亲和力,因此嗜酸性粒细胞之颗粒本身为碱性物质;碱性染料可和带负电荷的(酸性)物质相结合,这种物质称嗜碱性物质,对

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