分子生物学生论文 转基因技术及应用

转基因技术及应用

摘要：转基因技术是生命科学研究中最有效、最令人振奋的新技术之一，已广泛应用于生命科学的基础研究（基因功能研究）和应用研究方面，并取得了可喜的成就。转基因动物是解决特殊生物学问题常用的独特模型，它的研究成果标志着现有重组DNA技术与动物细胞、胚胎培养和操作技术的集成。研究和利用转基因动物已成为当代生物技术研究与开发领域中的热点之一。

关键词：转基因技术，基因工程，转基因山羊。

概述

将人工分离和修饰过的基因导入细胞和（或）生物体内，并通过导入基因的表达引起生物体性状的可遗传性修饰。这一技术称之为转基因技术（Transgenic technology）。经转基因技术修饰的生物体被称为“遗传修饰过的生物体”（Genetically modified organism，简称GMO），或转基因生物（transgenic organism ），包括转基因微生物、转基因植物及转基因动物。基因工程（gene engineering）：指在体外对DNA分子按照既定的目的和方案，对DNA进行剪切和重新连接，然后把它导入宿主细胞，以扩增有关DNA片段或表达有关基因产物等研究。 又称为基因操作、分子克隆、基因克隆或基因重组等。动物转基因技术的基本原理是运用转基因技术将改建后的目的基因导入实验动物的生殖细胞或着床前胚胎细胞，然后将转基因受精卵或着床前胚胎细胞移植到受体动物的子宫或输卵管内，使其发育成携带外源基因的转基因动物。不论采用何种方法制作转基因动物，都要首先制备目的基因，并将目的基因与表达载体连接构成重组转基因载体。

下面我们来设计一套从基因分离到制备转基因山羊（能从乳汁中分泌人的凝血因子IX) 的技术路线。

一 目的基因的制备

首先，我们利用mRNA反转录法获得目的基因，主要步骤如下：1 提取人的总RNA；2 进一步分离能表达人的凝血因子IX的mRNA；3 以mRNA为模板，用反转录酶合成cDNA； 4以cDNA为模板，用DNA聚合酶合成双链cDNA；5 双链DNA与载体连接（即重组）构成重组体；6 将重组体转入受体菌；7 筛选和鉴定重组体克隆并进行扩增，获得大量目的的基因cDNA；8 从受体菌中获得重组体；9 酶切鉴定获得的目的基因。

二 转基因载体的构建

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