SSR分子标记丰富水稻遗传图谱的方法

SSR标记

第２４卷第６期农业与技术、ｂ１．２４Ｎ０６２００４年１２月Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＤｅｃ．２００４ ９０

ＳＳＲ分子标记丰富水稻遗传图谱的方法

袁玲

（孝感学院生物科学技术学院，湖北孝感４３２０００）

【摘要】采用ｓｓＲ分子标记的遗传分析方法．以来源于野生稻的材料和栽培稻作为亲本，其后代重组自交系（ＲＩＬ）做为作图群体丰富水稻染色体上的遗传连锁图谱，为基因定位奠定基础．

【关键词】ｓｓＲ：重组自交系：水稻

中图分类号：ｓ５１１文献标识码：Ｂ

分子标记是一类以ＤＮＡ多态性为基础的遗传标基础培养基

记，能在ＤＮＡ水平上反映生物遗传基础的差异，是调浸米水ｐＨ值约４．０，于室温下浸泡过夜。将生物遗传育种领域里的一项新兴技术。与传统的形浸泡过来的米充分沥干，然后在１２１℃蒸米２０ｍｉｎ，态标记、细胞标记、生化标记相比，分子标记具有备用。

数量多，遍及整个基因组，多态性高，共显性，不１．３实验方法

受环境条件和发育时期影响等优点。目前己建立了１．３．１液态种子培养

１０多种ＤＮＡ分子标记技术。依据分子生物学检测技液态种子培养，温度３０＂Ｃ，摇床转速２００ｒ／ｍｉｎ；

装液量ｌＯＯｍｌ／５００ｍＬ，种龄３６ｈ。

术，大致可分为以Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术为核心的分子１．３．２固态培养材料准备

标记（限制性片段长度多态性，ＲＦＬＰ）和以聚合酶药服用，减少在基础培养基中加入适量５％葡萄糖和５％蛋白纯Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ药品的副作链式反应（ＰＣＲ）技术为核心的分子标记（随机扩增用。胨，在１２１℃灭菌３０分钟。

多态性ＤＮＡ＝妻囊蕈薹｝剿鲋氍藕蓖甜磊爱鳞ｉ茎量萃；荔本文对通过用红曲霉固态发酵生产Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ１．３．３接种

的培养条件进行初步试验，考察固态薹羹藕蝶驾。薹薹羹ｉ吒甥强始翟姥望蓦鞴；｜羔蠢萎ｉ；发展生产待培养料温度降至３０＂Ｃ，接入１０％量的液态Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ的可行性，并灌馑叠蠡鬟薹囊薹窭伟坏¨袖娶ｊ以直接作为中对培养条件进行优化选择。种子。

１．３．４培养发酵

１材料与方法这种后置于３２℃恒温箱中，培养５天，待菌丝

布满培养基后扣瓶１次，以后静置在２８℃下培养１５

１．１菌种天。

本校实验室保存的红曲霉（Ｍｏｎａｓｃｕｓｒｕｂｂｅｒ）。１．４分析方法

１．２培养材料含水量的测定：发酵结束后称发酵物的湿重，

种子培养基：粳米６％，蛋白胨３％，ＮａＮＯａ０．２％，然后在６０。Ｃ左右烘干至恒重，含水量的计算公式：ＭｇＳ０４ ７Ｈ２０．１％，ＫＨｅＰ０４０．２５％，ｐＨ自然。

发酵物湿重一发酵物干重

含水量＝×１００％

发酵物湿重

干物质得率的计算：

发酵前基质干重一发酵后基质干重

干物质得率（％）＝

发酵前基质干重

Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ含量测定：采用高效液相色谱法。万　方数据

第1页下一页