白藜芦醇对培养大鼠脑皮层星形胶质细胞增殖及谷氨酸代谢的影响

白藜芦醇对培养大鼠脑皮层星形胶质细胞增殖及谷氨酸代谢的影响

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中国现代医药杂志2009年1月第11卷第1期MMJC,Jan2009,Vol11,No．1

白藜芦醇对培养大鼠脑皮层星形胶质细胞增殖及谷氨酸代谢的影响

郑小华

曹颖平

目的

侯娟王梅华郑培烝

【摘要】响。方法

探讨不同浓度白藜芦醇(resveratrol，Res)对培养大鼠脑皮层星形胶质细胞增殖及谷氨酸代谢功能的影

原代提取并纯化培养脑皮层星形胶质细胞。采用5-溴脱氧尿核苷（BrdU）掺入法检测细胞增殖；通过同位素掺

入法和ELISA法检测谷氨酸代谢指标：谷氨酸摄取量、总谷胱苷肽（GSH）含量和谷氨酰胺合成酶（GlutamineSynthetase,

GS）含量与活性。结果Res抑制细胞增殖并随着浓度升高和培养时间延长而抑制增强。Res浓度为25μM和50μM时，谷

Res可抑制星形胶质细胞增殖；对其谷氨酸代谢具有二元效应，即低浓

氨酸摄取量和GSH含量显著增加（P<0.05）。而大于250μM时，两者却降低，但在此高浓度下，GS的细胞含量与活性却显著升高（P<0.05），而在低浓度时无任何变化。结论度可促进谷氨酸代谢，高浓度则降低谷氨酸代谢。

【关键词】

白藜芦醇

星形胶质细胞

谷氨酸代谢

Theeffectofresveratrolonthecellproliferationandthefunctionofglutamatemetabolisminprimarycorticalastro-cytesculturesofratsZhengXiaohua，CaoYingping，HouJuan，etal.TheAffiliatedUnionHospitalofFujianMedicalUniver-sity,Fuzhou350001

【Abstract】

ObjectiveToinvestigatetheeffectofdifferentconcentrationsofresveratrolonthecellproliferationandthe

Astrocytecultureswerepreparedofcerebral

functionofglutamatemetabolisminprimarycorticalastrocytesofrats.Methods

cortexfromneonateSDrats.TheproliferationwasmeasuredbytheincorporationofBrdU;Glutamateuptakewasmeasuredus-ingH3－glutamate;theactivityofglutaminesynthetaseandcontentofglutathioneweremeasuredbyenzymaticcolorimetricassays;thecontentofglutaminesynthetasewasmeasuredbyELISA.ResultsTheproliferationwasdecreased,andfollowedbythecon-centrationandthetime.Atconcentrationof25μMand50μM,resveratrolwasabletoincreaseglutamateuptakeandglutathionecontent,butat250μM,theydecreased.Butatthishighconcentration,glutaminesynthetaseactivitywasincreased.ConclusionTheresveratrolcaninhibitcellroliferation;andithasdualeffectonglutamateuptake,dependingonitsconcentration:lowcon-centrationcanpromotetheglutamatemetabolism,andhighconcentrationisopposite.

【Keywords】

ResveratrolAstrocyteGlutamatemetabolism

白藜芦醇(resveratrol，Res)是一种多酚类化合物，化学名为3，5，4，三羟基－反－均二苯乙烯，分子量为228．25。在多种植物中发现，如葡萄、浆果和花生。近年来的研究焦点都集中在其抗血小板聚集，抗氧化，抗炎特性及其抗肿瘤作用等。而对正常的星形胶质细胞的谷氨酸代谢功能方面研究较少。谷氨酸（盐）是中枢神经系统主要的兴奋性神经递质，其累积会导致神经变性紊乱。星形胶质细胞是脑负责谷氨酸（盐）转运的主要胶质细胞，通过谷氨酸依赖性的转运体（GLAST和GLT-1）调节其细胞外水

平。星形胶质细胞具有特异酶即谷氨酰胺合成酶（GlutamineSynthetase,GS）能催化谷氨酸（盐）的酰胺化反应形成谷氨酰胺，后者对神经元细胞具有重要作用。而且，星形胶质细胞摄取谷氨酸也可以合成维持谷胱苷肽，维持脑的抗氧化功能。本文主要通过白藜芦醇影响皮层星形胶质细胞的增殖及谷氨酸代谢功能，而对其神经保护作用进行研究。

1材料与方法

作者单位：350001通讯作者：曹颖平

福建医科大学协和临床医学院检验科

1.1主要试剂与仪器设备白藜芦醇（德宝生化，HPLC>98%)，GFAP抗体（CHEMICON）,免疫组化试剂盒与DAB显色试剂盒（中杉金桥），高糖DMEM(GIBCO)，胎牛血清（GIBCO）,总GSH检测试剂盒

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