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比浊法测定红霉素生物效价及其高通量测定方法探讨

!"# 中国抗生素杂志)##’年+月第+,卷第+期

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比浊法测定红霉素生物效价及其高通量测定方法探讨

谭俊!

高勇生!

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(!江西农业大学,南昌++##,D;

)华东理工大学生化反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心,上海)##)+"*

摘要:基于比浊法测定抗生素体外抑菌活性原理,以红霉素发酵液为研究对象,采用’&孔微孔板培养检定菌,直接用酶标仪检测各孔的光密度,定量分析发酵液中红霉素含量,并与管碟法比较。本文建立的抗生素生物效价检测方法具有快速、高效、样品和试剂用量少、结果可靠等优势,适合在有检测大量样品和快速获取结果的工作中推广。

关键词:红霉素;高通量;生物效价;比浊法中图分类号:JN,&D=D

文献标识码:-

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法,不仅快速而且成本低廉,适合在普通实验室进行,并以红霉素发酵过程中生物效价测定为例说明该方法的测定流程。!!"!

材料与方法菌株与试药

检定菌株为短小芽孢杆菌BEFEE(G*&+)#)C由华东理工大学国家生化工程技术研究中心提供,红霉素

(’)+:H/I)标品和红霉素发酵液由华东理工大学国家生化工程技术研究中心提供。!"#

仪器

(上海佑科仪器仪表有限公"D)紫外分光光度计司)、玻璃大试管J58K/6/:2<1;L0?FM+酶标仪、

近年来药品食品检验量的不断增加、药物高通量筛选和高产菌种高通量筛选的需求,迫切需要一种快速、规模化、分析准确且成本低的分析方法。与管碟法

比较@比浊法具有快速(检验仅需+A,5*、易于操作和采用液体培养法无扩散因素影响等优点,适用于大部分抗生素和含抗生素样品的含量测定B!A,C,被英美等国药典收录为标准分析方法。我国)##D版药典也把比浊法作为抗生素生物分析标准方法BDC,为此国内还开发了基于比浊法原理的抗生素效价测量仪,一次最多可培养,#多份样品,仍无法达到高通量要求。本文报道了一种以比浊法为检测原理,以酶标仪为检测仪器,以’&孔板为检定菌培养容器的高通量检测方

收稿日期:)##%$#+$+!

修回日期:)##%$#%$!+

()##&--#)#+#)和)##&--#)#+#,)基金项目:十一五%&+重点项目。作者简介:谭俊,女,生于!’%+年,在读硕士研究生。

!通讯作者,./012344506789:;<=8>:=9?

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