实验36 植物种子生命力的快速测定
.TTC法
一、原理
TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替(TTF)。
应用TTC的水溶液浸泡种子,使之渗入种胚的细胞内,如果种胚具有生命力,其中的脱氢酶就可以将TTC作为受氢体使之还原成为三苯甲月替而呈红色,如果种胚死亡便不能染色,种胚生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色,因此,可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生命力。
二、材料、仪器设备及试剂
(一)材料:水稻、小麦、玉米、棉花、油菜等待测种子。 (二)仪器设备:1. 小烧杯;2. 刀片;3. 镊子;4. 温箱;
(三)试剂:0.12%~0.5%TTC溶液(TTC可直接溶于水,溶于水后,呈中性,pH7±0.5,不宜久藏,应随用随配)。
三、实验步骤
1. 将种子用温水(约30℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。
2. 随机取种子100粒,水稻种子要去壳,豆类种子要去皮,然后沿种胚中央准确切开,取其一半备用。
3. 将准备好的种子浸于TTC试剂中,于恒温箱(30~35℃)中保温30min。
4. 染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪色。倒出TTC溶液,再用清水将种子冲洗1~2次,观察种胚被染色的情况,凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生命力的种子。种胚不被染色的为死种子,如果种胚中非关键性部位(如子叶的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色都属于不能正常发芽的种子
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