豆搜网 文档下载 文档下载导航
设为首页 | 加入收藏
搜索 请输入内容:  
 导航当前位置: 文档下载 > 所有分类 > 原代细胞培养和传代培养的方法及其
侵权投诉

原代细胞培养和传代培养的方法及其

原代细胞培养

原代细胞培养和传代培养的方法及其

原代细胞培养和传代培养的方法及其

初代培养

原理

将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,臵合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。

仪器、材料及试剂

仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱(37℃) 材料:动物组织块

试剂:1640培养基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒 初代消化培养法

1. 准备:取各种已消毒的培养用品臵于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2. 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。

3. 处理组织:把组织块臵于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先臵于含有青链霉素的混合液中30~60分钟。

4. 剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。

5. 消化:或用恒温水浴,或臵于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。

6. 分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。

7. 计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,

第1页

你可能喜欢

  • 细胞培养传代
  • 细胞培养技术
  • 动物细胞培养
  • 细胞培养步骤
  • 动物细胞融合
  • 细胞传代
  • 细胞复苏

热门文档

相关文档

  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其注意事项

    原代细胞培养和传代培养的方法及其注意事项_医药卫生_专业资料。原代细胞的培养及传代心得初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶...

  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其注意事项

    原代细胞培养和传代培养的方法及其注意事项_生物学_自然科学_专业资料。原代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合 剂(...

  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其

    原代细胞培养和传代培养的方法及其_生物学_自然科学_专业资料 暂无评价0人阅读0次下载举报文档 原代细胞培养和传代培养的方法及其_生物学_自然科学_专业资料。...

  • 原代细胞培养和传代培养的方法

    原代细胞培养和传代培养的方法。原代培养和传代培养细胞初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合 剂(常用 EDTA)或机械...

  • 05细胞培养 第五章 细胞的原代与传代培养

    05细胞培养 第五章 细胞的原代与传代培养_基础医学_医药卫生_专业资料。第五...原代培养方法分类 贴块法 消化法 93 分次消化 消化法的分类 解离释放细胞的...

  • 第5章 细胞的原代与传代培养

    第五章 细胞的原代与传代培养 ? 一、原代培养 概念:取自体内新鲜组织并臵...原代培养方法分类 贴块法 消化法 93 分次消化 消化法的分类 解离释放细胞的...

  • 细胞原代培养与传代

    原代培养 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞传代之前称为原代培养...集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳 培养基,这是最客观的方法,但比较...

  • 细胞的原代培养和传代培养

    内生理条件下使其在体外生 存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命活动过程的方法。...细胞培养一般可分为原代培养和传代培养。 所谓原代培养, 是指由体内取出组织或...

  • 细胞原代培养与传代

    细胞原代和 传代培养 金洁 目录一. 二.三. 细胞培养基本概念 细胞培养基本...? ? ? ? 培养细胞的生长方式贴附生长: 必须贴附于支持物表面才能生长。见于...

  • 实验六 细胞的原代和传代培养

    实验六 实验六 细胞的原代和传代培养 ? 实验目的 实验目的 ? 初步掌握哺乳...动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。 ? ? 实验方法 ? 单层细胞...

站点地图 | 文档上传 | 侵权投诉 | 手机版
新浪认证  诚信网站  绿色网站  可信网站   非经营性网站备案
本站所有资源均来自互联网,本站只负责收集和整理,均不承担任何法律责任,如有侵权等其它行为请联系我们.
文档下载 Copyright 2013 doc.docsou.com All Rights Reserved.  闽ICP备15022310号-9  闽公网安备 35021102001881号  email
返回顶部